azzar li ma jissaddadx 321 8 * 1.2 tubu coiled għall-iskambjatur tas-sħana

Tubi Kapillari

Grazzi talli żort Nature.com.Qed tuża verżjoni tal-browser b'appoġġ limitat CSS.Għall-aħjar esperjenza, nirrakkomandaw li tuża browser aġġornat (jew tiddiżattiva l-Modalità ta' Kompatibbiltà fl-Internet Explorer).Barra minn hekk, biex niżguraw appoġġ kontinwu, aħna nuru s-sit mingħajr stili u JavaScript.
Juri karużell ta' tliet slides f'daqqa.Uża l-buttuni Preċedenti u Li jmiss biex timxi minn tliet slides kull darba, jew uża l-buttuni slider fl-aħħar biex timxi minn tliet slides kull darba.
Ġie żviluppat spettrometru ta 'disa' kuluri ultra-kompatt (54 × 58 × 8.5 mm) u b'apertura wiesgħa (1 × 7 mm), "maqsuma fi tnejn" minn firxa ta' għaxar mirja dikrojċi, li ntużaw għal immaġni spettrali istantanja.Il-fluss tad-dawl inċidentali b'sezzjoni trasversali iżgħar mid-daqs tal-apertura huwa maqsum fi strixxa kontinwa 20 nm wiesgħa u disa 'flussi tal-kulur b'wavelengths ċentrali ta' 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 u 690 nm.Immaġini ta 'disa' flussi tal-kulur huma simultanjament imkejla b'mod effiċjenti mis-sensor tal-immaġni.B'differenza mill-firxa tal-mera dichroic konvenzjonali, il-firxa tal-mera dichroic żviluppata għandha konfigurazzjoni unika ta 'żewġ biċċiet, li mhux biss iżżid in-numru ta' kuluri li jistgħu jitkejlu simultanjament, iżda wkoll ittejjeb ir-riżoluzzjoni tal-immaġni għal kull nixxiegħa tal-kulur.L-ispettrometru żviluppat b'disa 'kuluri jintuża għal elettroforeżi b'erba' kapillari.Analiżi kwantitattiva simultanja ta 'tmien żebgħat li jemigraw simultanjament f'kull kapillari bl-użu ta' fluworexxenza ta 'disa' kuluri indotta minn laser.Peress li l-ispettrometru ta 'disa' kuluri mhux biss huwa ultra-żgħir u rħas, iżda għandu wkoll fluss luminuż għoli u riżoluzzjoni spettrali suffiċjenti għall-biċċa l-kbira tal-applikazzjonijiet tal-immaġni spettrali, jista 'jintuża b'mod wiesa' f'diversi oqsma.
Immaġini iperspettrali u multispettrali saret parti importanti mill-astronomija2, telerilevament għall-osservazzjoni tad-Dinja3,4, kontroll tal-kwalità tal-ikel u tal-ilma5,6, konservazzjoni tal-arti u arkeoloġija7, forensika8, kirurġija9, analiżi u dijanjostika bijomedika10,11 eċċ. Qasam 1 Teknoloġija indispensabbli ,12,13.Il-metodi għall-kejl tal-ispettru tad-dawl emess minn kull punt ta' emissjoni fil-kamp viżiv huma maqsuma fi (1) skanjar tal-punti (“xkupa”)14,15, (2) skanjar lineari (“paniku”)16,17,18 , (3) it-tul jiskenja mewġ19,20,21 u (4) immaġini22,23,24,25.Fil-każ ta’ dawn il-metodi kollha, ir-riżoluzzjoni spazjali, ir-riżoluzzjoni spettrali u r-riżoluzzjoni temporali għandhom relazzjoni ta’ kompromess9,10,12,26.Barra minn hekk, il-ħruġ tad-dawl għandu impatt sinifikanti fuq is-sensittività, jiġifieri l-proporzjon tas-sinjal għall-ħoss fl-immaġini spettrali26.Il-fluss luminuż, jiġifieri, l-effiċjenza tal-użu tad-dawl, huwa direttament proporzjonali għall-proporzjon tal-ammont attwali mkejjel ta 'dawl ta' kull punt luminuż għal kull unità ta 'ħin għall-ammont totali ta' dawl tal-medda ta 'wavelength imkejla.Il-Kategorija (4) hija metodu xieraq meta l-intensità jew l-ispettru tad-dawl emess minn kull punt li jarmi jinbidel maż-żmien jew meta l-pożizzjoni ta 'kull punt li jarmi tinbidel maż-żmien minħabba li l-ispettru tad-dawl emess mill-punti li jarmu kollha jitkejjel simultanjament.24.
Ħafna mill-metodi ta 'hawn fuq huma kkombinati ma' spettrometri kbar, kumplessi u/jew għaljin li jużaw 18-il gradilja jew 14, 16, 22, 23 priżma għall-klassijiet (1), (2) u (4) jew 20, 21 diski tal-filtri, filtri likwidi .Filtri tunable kristallin (LCTF)25 jew filtri tunable akusto-optic (AOTF)19 tal-kategorija (3).B'kuntrast, l-ispettrometri multi-mera tal-kategorija (4) huma żgħar u rħas minħabba l-konfigurazzjoni sempliċi tagħhom27,28,29,30.Barra minn hekk, għandhom fluss luminuż għoli minħabba li d-dawl kondiviż minn kull mera dichroic (jiġifieri, id-dawl trażmess u rifless tad-dawl inċidentali fuq kull mera dichroic) jintuża b'mod sħiħ u kontinwu.Madankollu, in-numru ta 'meded ta' wavelength (jiġifieri kuluri) li għandhom jitkejlu simultanjament huwa limitat għal madwar erbgħa.
L-immaġini spettrali bbażati fuq l-iskoperta tal-fluworexxenza tintuża komunement għall-analiżi multiplex fl-iskoperta u d-dijanjostika bijomedika 10, 13 .Fil-multiplexing, peress li analiti multipli (eż. DNA jew proteini speċifiċi) huma ttikkettjati b'żebgħat fluworexxenti differenti, kull analit preżenti f'kull punt ta' emissjoni fil-kamp viżiv huwa kkwantifikat bl-użu ta' analiżi multikomponent.32 ikisser l-ispettru ta' fluworexxenza misjuba emess minn kull punt ta' emissjoni.Matul dan il-proċess, żebgħa differenti, kull waħda li temettu fluworexxenza differenti, jistgħu jikkolocalizzaw, jiġifieri, jeżistu flimkien fl-ispazju u l-ħin.Bħalissa, in-numru massimu ta 'żebgħa li jistgħu jiġu eċċitati minn raġġ tal-laser wieħed huwa tmien33.Dan il-limitu ta 'fuq mhuwiex determinat mir-riżoluzzjoni spettrali (jiġifieri, in-numru ta' kuluri), iżda mill-wisa 'tal-ispettru tal-fluworexxenza (≥50 nm) u l-ammont ta' żebgħa Stokes shift (≤200 nm) f'FRET (bl-użu tal-FRET)10 .Madankollu, in-numru ta 'kuluri għandu jkun akbar minn jew ugwali għan-numru ta' żebgħa biex tiġi eliminata l-koinċidenza spettrali ta 'żebgħat imħallta31,32.Għalhekk, huwa meħtieġ li jiżdied in-numru ta 'kuluri mkejla simultanjament għal tmienja jew aktar.
Riċentement, ġie żviluppat spettrometru eptakrojku ultra-kompatt (li juża firxa ta 'mirja eptakrojċi u sensor tal-immaġni biex ikejjel erba' flussi fluworexxenti).L-ispettrometru huwa minn żewġ sa tliet ordnijiet ta 'kobor iżgħar minn spettrometri konvenzjonali li jużaw gradilji jew priżmi34,35.Madankollu, huwa diffiċli li tpoġġi aktar minn seba' mirja dikrojċi fi spettrometru u simultanjament tkejjel aktar minn seba' kuluri36,37.B'żieda fin-numru ta 'mirja dichroic, id-differenza massima fit-tulijiet tal-mogħdijiet ottiċi tal-flussi tad-dawl dichroic tiżdied, u jsir diffiċli li jintwerew il-flussi tad-dawl kollha fuq pjan sensorju wieħed.L-itwal tul tal-mogħdija ottika tal-fluss tad-dawl jiżdied ukoll, għalhekk il-wisa 'ta' l-apertura tal-ispettrometru (jiġifieri l-wisa 'massimu tad-dawl analizzat mill-ispettrometru) tonqos.
Bi tweġiba għall-problemi ta 'hawn fuq, ġie żviluppat spettrometru ultra-kompatt b'disa' kuluri b'firxa ta' mera dekakromatika "dikroika" b'żewġ saffi u sensur tal-immaġni għal immaġini spettrali istantanja [kategorija (4)].Meta mqabbel ma 'spettrometri preċedenti, l-ispettrometru żviluppat għandu differenza iżgħar fit-tul massimu tal-passaġġ ottiku u tul massimu iżgħar tal-passaġġ ottiku.Ġie applikat għall-elettroforeżi b'erba' kapillari biex tiskopri fluworexxenza b'disa' kuluri indotta bil-lejżer u biex tikkwantifika l-migrazzjoni simultanja ta 'tmien żebgħa f'kull kapillari.Peress li l-ispettrometru żviluppat mhux biss huwa ultra-żgħir u rħas, iżda għandu wkoll fluss luminuż għoli u riżoluzzjoni spettrali suffiċjenti għall-biċċa l-kbira tal-applikazzjonijiet tal-immaġni spettrali, jista 'jintuża b'mod wiesa' f'diversi oqsma.
L-ispettrometru tradizzjonali ta 'disa' kuluri huwa muri fil-fig.1a.Id-disinn tiegħu jsegwi dak tal-ispettrometru ta 'seba' kuluri ultra-żgħar preċedenti 31. Tikkonsisti f'disa 'mirja dikrojċi rranġati orizzontalment f'angolu ta' 45 ° lejn il-lemin, u s-senser tal-immaġni (S) jinsab 'il fuq mid-disa' mirja dikrojċi.Id-dawl li jidħol minn taħt (C0) huwa maqsum b'firxa ta' disa' mirja dikrojċi f'disa' flussi ta' dawl 'il fuq (C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 u C9).Id-disa 'flussi tal-kulur kollha jiġu mitmugħa direttament lis-sensor tal-immaġni u jiġu skoperti simultanjament.F'dan l-istudju, C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, u C9 huma f'ordni ta' wavelength u huma rappreżentati minn maġenta, vjola, blu, cyan, aħdar, isfar, oranġjo, aħmar-oranġjo, u aħmar, rispettivament.Għalkemm dawn id-denominazzjonijiet tal-kulur jintużaw f'dan id-dokument, kif muri fil-Figura 3, minħabba li huma differenti mill-kuluri attwali li jidhru mill-għajn tal-bniedem.
Dijagrammi skematiċi ta' spettrometri ta' disa' kuluri konvenzjonali u ġodda....(a) Spettrometru konvenzjonali b'disa' kuluri b'firxa ta' disa' mirja dikrojċi.(b) Spettrometru ġdid b'disa' kuluri b'matriċi ta' mera dikrojka b'żewġ saffi.Il-fluss tad-dawl inċidentali C0 huwa maqsum f'disa 'flussi tad-dawl ikkuluriti C1-C9 u misjuba mis-sensor tal-immaġni S.
L-ispettrometru ġdid ta 'disa' kuluri żviluppat għandu ħakk tal-mera dichroic b'żewġ saffi u sensor tal-immaġni, kif muri fil-Fig. 1b.Fil-livell t'isfel, ħames mirja dichroic huma inklinati 45° lejn il-lemin, allinjati mal-lemin miċ-ċentru tal-firxa ta 'decamers.Fil-livell ta 'fuq, ħames mirja dichroic addizzjonali huma inklinati 45° lejn ix-xellug u jinsabu miċ-ċentru lejn ix-xellug.Il-mera dikroika l-aktar fuq ix-xellug tas-saff t'isfel u l-mera dikroika l-aktar fuq il-lemin tas-saff ta 'fuq jikkoinċidu lil xulxin.Il-fluss tad-dawl inċidentali (C0) huwa maqsum minn taħt f'erba 'flussi kromatiċi ħerġin (C1-C4) b'ħames mirja dichroic fuq il-lemin u ħames flussi kromatiċi ħerġin (C5-C4) b'ħames mirja dichroic fuq ix-xellug C9).Bħal spettrometri konvenzjonali ta 'disa' kuluri, id-disa 'flussi ta' kuluri kollha huma injettati direttament fis-sensor tal-immaġni (S) u misjuba simultanjament.Meta tqabbel il-Figuri 1a u 1b, wieħed jista 'jara li fil-każ tal-ispettrometru ġdid ta' disa 'kuluri, kemm id-differenza massima kif ukoll l-itwal tul tal-mogħdija ottika tad-disa' flussi tal-kulur huma mnaqqsa bin-nofs.
Il-kostruzzjoni dettaljata ta 'firxa ta' mera dichroic ultra-żgħar b'żewġ saffi 29 mm (wisa ') × 31 mm (fond) × 6 mm (għoli) hija murija fil-Figura 2. L-array ta 'mera dichroic deċimali tikkonsisti f'ħames mirja dichroic fuq il-lemin (M1-M5) u ħames mirja dikrojċi fuq ix-xellug (M6-M9 u M5 ieħor), kull mera dikrojka hija mwaħħla fil-parentesi tal-aluminju ta 'fuq.Il-mirja dichroic kollha huma mqassma biex jikkumpensaw għall-ispostament parallel minħabba rifrazzjoni tal-fluss mill-mirja.Taħt M1, filtru band-pass (BP) huwa ffissat.Id-dimensjonijiet M1 u BP huma 10mm (ġenb twil) x 1.9mm (ġenb qasir) x 0.5mm (ħxuna).Id-dimensjonijiet tal-mirja dichroic li fadal huma 15 mm × 1.9 mm × 0.5 mm.Il-pitch tal-matriċi bejn M1 u M2 huwa 1.7 mm, filwaqt li l-pitch tal-matriċi ta 'mirja dikrojċi oħra huwa 1.6 mm.Fuq il-fig.2c jgħaqqad il-fluss tad-dawl inċidentali C0 u disa 'flussi tad-dawl ikkuluriti C1-C9, separati minn matriċi de-chamber ta' mirja.
Kostruzzjoni ta' matriċi ta' mera dikroika b'żewġ saffi.(a) Veduta perspettiva u (b) dehra ta' sezzjoni trasversali ta' firxa ta' mera dikrojka b'żewġ saffi (dimensjonijiet 29 mm x 31 mm x 6 mm).Tikkonsisti f'ħames mirja dichroic (M1-M5) li jinsabu fis-saff t'isfel, ħames mirja dichroic (M6-M9 u M5 ieħor) li jinsabu fis-saff ta 'fuq, u filtru bandpass (BP) li jinsab taħt M1.(c) Veduta b'sezzjoni trasversali f'direzzjoni vertikali, b'koinċidenza C0 u C1-C9.
Il-wisa 'ta' l-apertura fid-direzzjoni orizzontali, indikata bil-wisa 'C0 f'Fig. 2, c, hija 1 mm, u fid-direzzjoni perpendikolari għall-pjan ta' Fig. 2, c, mogħtija mid-disinn tal-parentesi ta 'l-aluminju, – 7 mm.Jiġifieri, l-ispettrometru ġdid ta 'disa' kuluri għandu daqs ta 'apertura kbira ta' 1 mm × 7 mm.Il-mogħdija ottika ta 'C4 hija l-itwal fost C1-C9, u l-mogħdija ottika ta' C4 ġewwa l-firxa tal-mera dichroic, minħabba d-daqs ultra-żgħir ta 'hawn fuq (29 mm × 31 mm × 6 mm), hija 12 mm.Fl-istess ħin, it-tul tal-mogħdija ottika ta 'C5 huwa l-iqsar fost C1-C9, u t-tul tal-mogħdija ottika ta' C5 huwa 5.7mm.Għalhekk, id-differenza massima fit-tul tal-passaġġ ottiku hija 6.3 mm.It-tulijiet tal-mogħdija ottika ta 'hawn fuq huma kkoreġuti għat-tul tal-mogħdija ottika għat-trasmissjoni ottika ta' M1-M9 u BP (mill-kwarz).
Il-proprjetajiet spettrali ta' М1−М9 u VR huma kkalkulati sabiex il-flussi С1, С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 u С9 huma fil-medda ta' wavelength 520-540, 540-560, 65-560, 65, 80 –600, 600–620, 620–640, 640–660, 660–680, u 680–700 nm, rispettivament.
Ritratt tal-matriċi manifatturat ta 'mirja dekakromatiċi huwa muri fil-Fig. 3a.M1-M9 u BP huma mwaħħla mal-inklinazzjoni ta '45 ° u l-pjan orizzontali tal-appoġġ tal-aluminju, rispettivament, filwaqt li M1 u BP huma moħbija fuq in-naħa ta' wara tal-figura.
Produzzjoni ta 'firxa ta' mirja decan u d-dimostrazzjoni tagħha.(a) Firxa ta' mirja dekakromatiċi fabbrikati.(b) Immaġini maqsuma ta' 1 mm × 7 mm b'disa' kuluri proġettata fuq folja ta' karta mqiegħda quddiem firxa ta' mirja dekakromatiċi u backlit b'dawl abjad.(c) Arranġament ta' mirja dekokromatiċi illuminati b'dawl abjad minn wara.(d) Nixxiegħa ta 'qsim ta' disa 'kuluri li toħroġ mill-firxa ta' mera decane, osservata billi tpoġġi canister akriliku mimli duħħan quddiem il-firxa ta 'mera decane f'ċ u tiskura l-kamra.
L-ispettru ta 'trasmissjoni mkejla ta' M1-M9 C0 f'angolu ta 'inċidenza ta' 45 ° u l-ispettru ta 'trasmissjoni mkejjel ta' BP C0 f'angolu ta 'inċidenza ta' 0 ° huma murija fil-Fig.4a.L-ispettri ta 'trażmissjoni ta' C1-C9 relattivi għal C0 huma murija fil-Fig.4b.Dawn l-ispettri ġew ikkalkulati mill-ispettri fil-Fig.4a skond il-mogħdija ottika C1-C9 f'Fig. 4a.1b u 2c.Pereżempju, TS(C4) = TS (BP) × [1 − TS (M1)] × TS (M2) × TS (M3) × TS (M4) × [1 − TS (M5)], TS(C9 ) = TS (BP) × TS (M1) × [1 − TS (M6)] × TS (M7) × TS (M8) × TS (M9) × [1 − TS (M5)], fejn TS(X) u [ 1 - TS(X)] huma l-ispettri ta' trasmissjoni u riflessjoni ta' X, rispettivament.Kif muri fil-Figura 4b, il-bandwidths (bandwidth ≥50%) ta 'C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 u C9 huma 521-540, 541-562, 563-580, 581-602, 603 -623, 624-641, 642-657, 659-680 u 682-699 nm.Dawn ir-riżultati huma konsistenti mal-firxiet żviluppati.Barra minn hekk, l-effiċjenza tal-użu tad-dawl C0 hija għolja, jiġifieri, it-trażmissjoni massima tad-dawl C1-C9 medja hija 92%.
Spettri ta' trażmissjoni ta' mera dikrojka u fluss ta' disa' kuluri maqsum.(a) Spettri ta 'trażmissjoni mkejla ta' M1-M9 f'inċidenza ta '45 ° u BP f'inċidenza ta' 0 °.(b) Spettri ta' trażmissjoni ta' C1–C9 relattivi għal C0 ikkalkulati minn (a).
Fuq il-fig.3c, il-firxa ta 'mirja dichroic tinsab vertikalment, sabiex in-naħa tal-lemin tagħha f'Fig. 3a tkun in-naħa ta' fuq u r-raġġ abjad tal-LED kollimat (C0) ikun backlit.Il-firxa ta' mirja dekakromatiċi murija fil-Figura 3a hija mmuntata f'adapter ta' 54 mm (għoli) × 58 mm (fond) × 8.5 mm (ħxuna).Fuq il-fig.3d, minbarra l-istat muri fil-fig.3c, tank akriliku mimli duħħan tqiegħed quddiem firxa ta 'mirja dekokromatiċi, bid-dwal fil-kamra mitfija.Bħala riżultat, disa 'flussi dichroic huma viżibbli fit-tank, li joħorġu minn firxa ta' mirja decachromatic.Kull nixxiegħa maqsuma għandha sezzjoni trasversali rettangolari b'dimensjonijiet ta '1 × 7 mm, li tikkorrispondi għad-daqs tal-apertura tal-ispettrometru ġdid b'disa' kuluri.Fil-Figura 3b, titqiegħed folja tal-karta quddiem il-firxa ta 'mirja dichroic fil-Figura 3c, u immaġni 1 x 7 mm ta' disa 'flussi dichroic proġettati fuq il-karta hija osservata mid-direzzjoni tal-moviment tal-karta.nixxigħat.Id-disa 'flussi ta' separazzjoni tal-kulur fil-fig.3b u d huma C4, C3, C2, C1, C5, C6, C7, C8 u C9 minn fuq għal isfel, li jistgħu jidhru wkoll fil-figuri 1 u 2. 1b u 2c.Huma osservati f'kuluri li jikkorrispondu mal-wavelengths tagħhom.Minħabba l-intensità baxxa tad-dawl abjad tal-LED (ara Fig. S3 Supplimentari) u s-sensittività tal-kamera tal-kulur użata biex taqbad C9 (682-699 nm) f'Fig. Flussi oħra ta 'qsim huma dgħajfa.Bl-istess mod, C9 kien viżibbli ftit għall-għajn.Sadanittant, C2 (it-tieni fluss minn fuq) jidher aħdar fil-Figura 3, iżda jidher aktar isfar għall-għajn.
It-tranżizzjoni mill-Figura 3c għal d hija murija fil-Vidjo Supplimentari 1. Immedjatament wara li d-dawl abjad mill-LED jgħaddi mill-firxa tal-mera decachromatic, tinqasam simultanjament f'disa 'flussi ta' kuluri.Fl-aħħar, id-duħħan fil-bettija inħela gradwalment minn fuq għal isfel, sabiex id-disa' trabijiet ikkuluriti sparixxew ukoll minn fuq għal isfel.B'kuntrast, fil-Vidjo Supplimentari 2, meta l-wavelength tal-fluss tad-dawl inċident fuq il-firxa ta 'mirja decachromatic inbidel minn twil għal qasir fl-ordni ta' 690, 671, 650, 632, 610, 589, 568, 550 u 532 nm ., Jintwerew biss il-flussi maqsuma korrispondenti tad-disa 'flussi maqsuma fl-ordni ta' C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2, u C1.Il-ġibjun akriliku huwa sostitwit b'ġabra tal-kwarz, u l-qxur ta 'kull fluss shunted jistgħu jiġu osservati b'mod ċar mid-direzzjoni 'l fuq imżerżaq.Barra minn hekk, is-sub-video 3 huwa editjat b'tali mod li l-porzjon tal-bidla tal-wavelength tas-sub-video 2 jerġa' jindaqq.Din hija l-aktar espressjoni elokwenti tal-karatteristiċi ta 'firxa dekokromatika ta' mirja.
Ir-riżultati ta 'hawn fuq juru li l-firxa tal-mera decachromatic manifatturat jew l-ispettrometru ġdid ta' disa 'kuluri jaħdem kif maħsub.L-ispettrometru ġdid ta 'disa' kuluri huwa ffurmat billi twaħħal firxa ta 'mirja dekakromatiċi b'adapters direttament fuq il-bord tas-sensorju tal-immaġni.
Fluss luminuż b'medda ta 'wavelength minn 400 sa 750 nm, emess minn erba' punti ta 'radjazzjoni φ50 μm, li jinsabu f'intervalli ta' 1 mm fid-direzzjoni perpendikolari għall-pjan ta 'Fig. 2c, rispettivament Riċerki 31, 34. Il-firxa ta' erba 'lenti tikkonsisti minn erba 'lentijiet φ1 mm b'tul fokali ta' 1.4 mm u pitch ta '1 mm.Erba 'flussi kollimati (erba' C0) huma inċidenti fuq id-DP ta 'spettrometru ġdid b'disa' kuluri, spazjati f'intervalli ta '1 mm.Array ta' mirja dikrojċi jaqsam kull nixxiegħa (C0) f'disa' flussi ta' kuluri (C1-C9).Is-36 nixxiegħa li jirriżultaw (erba 'settijiet ta' C1-C9) imbagħad jiġu injettati direttament f'sensor ta 'immaġni CMOS (S) imqabbad direttament ma' firxa ta 'mirja dikrojċi.Bħala riżultat, kif muri fil-Fig. 5a, minħabba d-differenza żgħira fil-passaġġ ottiku massimu u l-passaġġ ottiku massimu qasir, l-immaġini tas-36 nixxiegħa kollha ġew skoperti simultanjament u b'mod ċar bl-istess daqs.Skont l-ispettri downstream (ara l-Figura Supplimentari S4), l-intensità tal-immaġni tal-erba 'gruppi C1, C2 u C3 hija relattivament baxxa.Sitta u tletin immaġini kienu 0.57 ± 0.05 mm fid-daqs (medja ± SD).Għalhekk, l-ingrandiment tal-immaġni kien ta 'medja ta' 11.4.L-ispazjar vertikali bejn l-immaġini huwa ta' medja ta' 1 mm (l-istess spazjar bħal firxa tal-lenti) u l-ispazjar orizzontali huwa medju ta '1.6 mm (l-istess spazjar bħal firxa ta' mera dikrojka).Minħabba li d-daqs tal-immaġni huwa ħafna iżgħar mid-distanza bejn l-immaġini, kull immaġini tista 'titkejjel b'mod indipendenti (b'crosstalk baxx).Sadanittant, immaġini ta 'tmienja u għoxrin nixxiegħa rreġistrati mill-ispettrometru konvenzjonali ta' seba 'kuluri użat fl-istudju preċedenti tagħna huma murija fil-Fig. 5 B. Il-firxa ta' seba 'mirja dikrojċi nħolqot billi tneħħew iż-żewġ mirja dikroiċi l-aktar tal-lemin mill-firxa ta' disa 'mirja dikroiċi. mirja fil-Figura 1a.Mhux l-immaġini kollha huma qawwija, id-daqs tal-immaġni jiżdied minn C1 għal C7.Tmienja u għoxrin immaġini huma 0.70 ± 0.19 mm fid-daqs.Għalhekk, huwa diffiċli li tinżamm riżoluzzjoni għolja fl-immaġini kollha.Il-koeffiċjent tal-varjazzjoni (CV) għad-daqs tal-immaġni 28 fil-Figura 5b kien 28%, filwaqt li s-CV għad-daqs tal-immaġni 36 fil-Figura 5a naqas għal 9%.Ir-riżultati ta 'hawn fuq juru li l-ispettrometru ġdid ta' disa 'kuluri mhux biss iżid in-numru ta' kuluri mkejla simultanjament minn sebgħa għal disgħa, iżda għandu wkoll riżoluzzjoni ta 'immaġni għolja għal kull kulur.
Tqabbil tal-kwalità tal-immaġni maqsuma ffurmata minn spettrometri konvenzjonali u ġodda.(a) Erba 'gruppi ta' immaġini separati ta 'disa' kuluri (C1-C9) iġġenerati mill-ispettrometru ġdid ta 'disa' kuluri.(b) Erba 'settijiet ta' stampi separati b'seba 'kuluri (C1-C7) iffurmati bi spettrometru konvenzjonali ta' seba 'kuluri.Flussi (C0) b'tul ta' mewġ minn 400 sa 750 nm minn erba' punti ta' emissjoni huma kollimati u inċidenti fuq kull spettrometru, rispettivament.
Il-karatteristiċi spettrali tal-ispettrometru b'disa' kuluri ġew evalwati b'mod sperimentali u r-riżultati tal-evalwazzjoni huma murija fil-Figura 6. Innota li l-Figura 6a turi l-istess riżultati bħall-Figura 5a, jiġifieri f'tul ta 'mewġ ta' 4 C0 400–750 nm, is-36 immaġini kollha huma skoperti (4 gruppi C1–C9).Għall-kuntrarju, kif muri f'Fig. 6b–j, meta kull C0 għandu wavelength speċifiku ta' 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670, jew 690 nm, hemm kważi biss erba' immaġini korrispondenti (erba' gruppi misjuba C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 jew C9).Madankollu, xi wħud mill-immaġini ħdejn l-erba 'immaġini korrispondenti huma dgħajjef ħafna skoperti minħabba li l-ispettri ta' trażmissjoni C1-C9 murija f'Fig. 4b jikkoinċidu ftit u kull C0 għandu faxxa ta '10 nm f'wavelength speċifiku kif deskritt fil-metodu.Dawn ir-riżultati huma konsistenti mal-ispettri ta 'trasmissjoni C1-C9 murija fil-Fig.4b u videos supplimentari 2 u 3. Fi kliem ieħor, l-ispettrometru ta 'disa' kuluri jaħdem kif mistenni abbażi tar-riżultati murija fil-fig.4b.Għalhekk, huwa konkluż li d-distribuzzjoni tal-intensità tal-immaġni C1-C9 hija l-ispettru ta 'kull C0.
Karatteristiċi spettrali ta' spettrometru ta' disa' kuluri.L-ispettrometru ġdid b'disa' kuluri jiġġenera erba' settijiet ta' immaġini separati b'disa' kuluri (C1-C9) meta d-dawl inċidentali (erba' C0) ikollu wavelength ta' (a) 400-750 nm (kif muri fil-Figura 5a), (b) 530 nm.nm, (c) 550 nm, (d) 570 nm, (e) 590 nm, (f) 610 nm, (g) 630 nm, (h) 650 nm, (i) 670 nm, (j) 690 nm, rispettivament.
L-ispettrometru żviluppat b'disa 'kuluri ntuża għal elettroforeżi b'erba' kapillari (għad-dettalji, ara Materjali Supplimentari)31,34,35.Il-matriċi ta 'erba' kapillari tikkonsisti minn erba 'kapillari (dijametru ta' barra 360 μm u dijametru ta 'ġewwa 50 μm) li jinsabu f'intervalli ta' 1 mm fis-sit tal-irradjazzjoni tal-lejżer.Kampjuni li fihom frammenti tad-DNA ttikkettjati bi 8 żebgħa, jiġifieri FL-6C (żebgħa 1), JOE-6C (żebgħa 2), dR6G (żebgħa 3), TMR-6C (żebgħa 4), CXR-6C (żebgħa 5), ​​TOM- 6C (żebgħa 6), LIZ (żebgħa 7), u WEN (żebgħa 8) f'ordni axxendenti ta 'wavelength fluworexxenti, separati f'kull wieħed minn erba' kapillari (minn hawn 'il quddiem imsejħa Cap1, Cap2, Cap3, u Cap4).Il-fluworexxenza kkaġunata bil-lejżer minn Cap1-Cap4 ġiet ikkollimata b'firxa ta 'erba' lentijiet u simultanjament irreġistrata bi spettrometru ta 'disa' kuluri.Id-dinamika ta 'intensità ta' fluworexxenza ta 'disa' kuluri (C1-C9) waqt l-elettroforeżi, jiġifieri, elettroforegramma ta 'disa' kuluri ta 'kull kapillari, tidher f'Fig. 7a.Elettroforegramma ekwivalenti b'disa' kuluri tinkiseb f'Cap1-Cap4.Kif indikat mill-vleġeġ Cap1 fil-Figura 7a, it-tmien qċaċet fuq kull elettroforegramma ta 'disa' kuluri juru emissjoni waħda ta 'fluworexxenza minn Dye1-Dye8, rispettivament.
Kwantifikazzjoni simultanja ta 'tmien żebgħa bl-użu ta' spettrometru ta 'elettroforeżi b'erba' kapillari b'disa' kuluri.(a) Elettroforegramma b'disa' kuluri (C1-C9) ta' kull kapillari.It-tmien qċaċet indikati bil-vleġeġ Cap1 juru emissjonijiet ta' fluworexxenza individwali ta' tmien żebgħa (Dye1-Dye8).Il-kuluri tal-vleġeġ jikkorrispondu mal-kuluri (b) u (c).(b) Spettri ta' fluworexxenza ta' tmien żebgħa (Dye1-Dye8) għal kull kapillari.c Elettroferogrammi ta' tmien żebgħa (Dye1-Dye8) għal kull kapillari.Il-qċaċet tal-frammenti tad-DNA bit-tikketta Dye7 huma indikati bi vleġeġ, u t-tulijiet tal-bażi Cap4 tagħhom huma indikati.
Id-distribuzzjonijiet tal-intensità ta 'C1-C9 fuq tmien qċaċet huma murija fil-Fig.7b, rispettivament.Minħabba li kemm C1-C9 u Dye1-Dye8 huma f'ordni ta 'wavelength, it-tmien distribuzzjonijiet fil-Fig. 7b juru l-ispettri ta' fluworexxenza ta 'Dye1-Dye8 sekwenzjali mix-xellug għal-lemin.F'dan l-istudju, Dye1, Dye2, Dye3, Dye4, Dye5, Dye6, Dye7, u Dye8 jidhru fil-maġenta, vjola, blu, cyan, aħdar, isfar, oranġjo u aħmar, rispettivament.Innota li l-kuluri tal-vleġeġ fil-Fig. 7a jikkorrispondu għall-kuluri taż-żebgħa fil-Fig. 7b.L-intensitajiet tal-fluworexxenza C1-C9 għal kull spettru fil-Figura 7b ġew normalizzati sabiex is-somma tagħhom tkun ugwali għal wieħed.Inkisbu tmien spettri ta' fluworexxenza ekwivalenti minn Cap1-Cap4.Wieħed jista' josserva b'mod ċar il-koinċidenza spettrali tal-fluworexxenza bejn iż-żebgħa 1-żebgħa 8.
Kif muri fil-Figura 7c, għal kull kapillari, l-elettroforegramma b'disa' kuluri fil-Figura 7a ġiet ikkonvertita f'elettroferogramma bi tmien żebgħa permezz ta 'analiżi b'ħafna komponenti bbażata fuq it-tmien spettri ta' fluworexxenza fil-Figura 7b (ara Materjali Supplimentari għad-dettalji).Peress li l-koinċidenza spettrali tal-fluworexxenza fil-Figura 7a mhix murija fil-Figura 7c, Dye1-Dye8 jista 'jiġi identifikat u kwantifikat individwalment f'kull punt ta' ħin, anke jekk ammonti differenti ta 'Dye1-Dye8 jiffluworexxew fl-istess ħin.Dan ma jistax isir b'detezzjoni tradizzjonali ta 'seba' kuluri31, iżda jista 'jinkiseb bl-iskoperta ta' disa 'kuluri żviluppata.Kif muri mill-vleġeġ Cap1 fil-Fig. 7c, biss l-emissjoni fluworexxenti singlets Dye3 (blu), Dye8 (aħmar), Dye5 (aħdar), Dye4 (cyan), Dye2 (vjola), Dye1 (maġenta), u Dye6 (Isfar). ) huma osservati fl-ordni kronoloġika mistennija.Għall-emissjoni fluworexxenti taż-żebgħa 7 (oranġjo), minbarra l-quċċata waħda indikata mill-vleġġa oranġjo, ġew osservati diversi qċaċet singoli oħra.Dan ir-riżultat huwa dovut għall-fatt li l-kampjuni kien fihom standards ta 'daqs, frammenti tad-DNA bit-tikketta Dye7 b'tulijiet ta' bażi differenti.Kif muri fil-Figura 7c, għal Cap4 dawn it-tulijiet bażi huma 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214 u 220 tulijiet bażi.
Il-karatteristiċi ewlenin tal-ispettrometru ta 'disa' kuluri, żviluppat bl-użu ta 'matriċi ta' mirja dikrojċi b'żewġ saffi, huma daqs żgħir u disinn sempliċi.Peress li l-firxa ta 'mirja decachromatic ġewwa l-adapter murija fil-fig.3c immuntat direttament fuq il-bord tas-sensorju tal-immaġni (ara Fig. S1 u S2), l-ispettrometru ta 'disa' kuluri għandu l-istess dimensjonijiet bħall-adapter, jiġifieri 54 × 58 × 8.5 mm.(ħxuna) .Dan id-daqs ultra-żgħir huwa minn żewġ sa tliet ordnijiet ta 'kobor iżgħar minn spettrometri konvenzjonali li jużaw gradilji jew priżmi.Barra minn hekk, peress li l-ispettrometru ta 'disa' kuluri huwa kkonfigurat b'tali mod li d-dawl jolqot il-wiċċ tas-sensor tal-immaġni b'mod perpendikolari, l-ispazju jista 'jiġi allokat faċilment għall-ispettrometru ta' disa 'kuluri f'sistemi bħal mikroskopji, ċitometri tal-fluss, jew analizzaturi.Analizzatur tal-elettroforesi tal-ħakk kapillari għal minjaturizzazzjoni saħansitra akbar tas-sistema.Fl-istess ħin, id-daqs ta 'għaxar mirja dichroic u filtri bandpass użati fl-ispettrometru ta' disa 'kuluri huwa biss 10 × 1.9 × 0.5 mm jew 15 × 1.9 × 0.5 mm.Għalhekk, aktar minn 100 mera dichroic żgħar bħal dawn u filtri bandpass, rispettivament, jistgħu jinqatgħu minn mera dichroic u filtru bandpass ta '60 mm2, rispettivament.Għalhekk, firxa ta 'mirja dekakromatiċi jistgħu jiġu manifatturati bi prezz baxx.
Karatteristika oħra ta 'l-ispettrometru ta' disa 'kuluri hija l-karatteristiċi spettrali eċċellenti tiegħu.B'mod partikolari, tippermetti l-akkwist ta 'immaġni spettrali ta' snapshots, jiġifieri, l-akkwist simultanju ta 'immaġni b'informazzjoni spettrali.Għal kull immaġini, inkiseb spettru kontinwu b'medda ta 'wavelength minn 520 sa 700 nm u riżoluzzjoni ta' 20 nm.Fi kliem ieħor, jiġu skoperti disa' intensitajiet ta' kulur ta' dawl għal kull immaġini, jiġifieri disa' meded ta' 20 nm li jinqasmu b'mod ugwali l-medda ta' wavelength minn 520 sa 700 nm.Billi tbiddel il-karatteristiċi spettrali tal-mera dichroic u l-filtru bandpass, il-medda ta 'wavelength tad-disa' meded u l-wisa 'ta' kull faxxa jistgħu jiġu aġġustati.L-iskoperta ta 'disa' kuluri tista 'tintuża mhux biss għal kejl ta' fluworexxenza b'immaġni spettrali (kif deskritt f'dan ir-rapport), iżda wkoll għal ħafna applikazzjonijiet komuni oħra li jużaw immaġini spettrali.Għalkemm l-immaġini iperspettrali jistgħu jiskopru mijiet ta 'kuluri, instab li anke bi tnaqqis sinifikanti fin-numru ta' kuluri li jistgħu jinstabu, oġġetti multipli fil-kamp tal-vista jistgħu jiġu identifikati bi preċiżjoni suffiċjenti għal ħafna applikazzjonijiet38,39,40.Minħabba li r-riżoluzzjoni spazjali, ir-riżoluzzjoni spettrali u r-riżoluzzjoni temporali għandhom kompromess fl-immaġini spettrali, it-tnaqqis tan-numru ta 'kuluri jista' jtejjeb ir-riżoluzzjoni spazjali u r-riżoluzzjoni temporali.Jista 'wkoll juża spettrometri sempliċi bħal dak żviluppat f'dan l-istudju u jkompli jnaqqas l-ammont ta' komputazzjoni.
F'dan l-istudju, tmien żebgħa ġew ikkwantifikati simultanjament permezz ta 'separazzjoni spettrali tal-ispettri ta' fluworexxenza li jikkoinċidu tagħhom ibbażati fuq l-iskoperta ta 'disa' kuluri.Sa disa 'żebgħa jistgħu jiġu kkwantifikati fl-istess ħin, li jikkoeżistu fiż-żmien u fl-ispazju.Vantaġġ speċjali tal-ispettrometru ta 'disa' kuluri huwa l-fluss luminuż għoli tiegħu u l-apertura kbira (1 × 7 mm).Il-firxa tal-mera decane għandha trażmissjoni massima ta '92% tad-dawl mill-apertura f'kull waħda mid-disa' firxiet ta 'wavelength.L-effiċjenza tal-użu tad-dawl inċidentali fil-medda ta 'wavelength minn 520 sa 700 nm hija kważi 100%.F'tali firxa wiesgħa ta 'wavelengths, l-ebda gradilja tad-diffrazzjoni ma tista' tipprovdi effiċjenza għolja ta 'użu bħal din.Anke jekk l-effiċjenza tad-diffrazzjoni ta 'gradilja tad-diffrazzjoni taqbeż id-90% f'ċertu wavelength, hekk kif id-differenza bejn dak wavelength u wavelength partikolari tiżdied, l-effiċjenza tad-diffrazzjoni f'wavelength ieħor tonqos41.Il-wisa 'ta' l-apertura perpendikulari għad-direzzjoni tal-pjan f'Fig. 2c tista 'tiġi estiża minn 7 mm għall-wisa' tas-sensor tal-immaġni, bħal fil-każ tas-senser tal-immaġni użat f'dan l-istudju, billi timmodifika ftit il-firxa tad-decamer.
L-ispettrometru ta 'disa' kuluri jista 'jintuża mhux biss għall-elettroforeżi kapillari, kif muri f'dan l-istudju, iżda wkoll għal diversi skopijiet oħra.Per eżempju, kif muri fil-figura hawn taħt, spettrometru ta 'disa' kuluri jista 'jiġi applikat għal mikroskopju fluworexxenti.Il-pjan tal-kampjun jintwera fuq is-sensor tal-immaġni tal-ispettrometru b'disa' kuluri permezz ta' għan 10x.Id-distanza ottika bejn il-lenti oġġettiva u s-senser tal-immaġni hija ta '200 mm, filwaqt li d-distanza ottika bejn il-wiċċ tal-inċident tal-ispettrometru b'disa' kuluri u s-senser tal-immaġni hija biss 12 mm.Għalhekk, l-immaġni kienet maqtugħa għal bejn wieħed u ieħor id-daqs tal-apertura (1 × 7 mm) fil-pjan ta 'inċidenza u maqsuma f'disa' immaġini bil-kulur.Jiġifieri, immaġni spettrali ta 'snapshot ta' disa 'kuluri tista' tittieħed fuq żona ta '0.1 × 0.7 mm fil-pjan tal-kampjun.Barra minn hekk, huwa possibbli li tinkiseb immaġni spettrali b'disa' kuluri ta 'żona akbar fuq il-pjan tal-kampjun billi tiskennja l-kampjun relattiv għall-objettiv fid-direzzjoni orizzontali f'Fig. 2c.
Il-komponenti tal-firxa tal-mera decachromatic, jiġifieri M1-M9 u BP, kienu magħmulin apposta minn Asahi Spectra Co., Ltd bl-użu ta 'metodi ta' preċipitazzjoni standard.Materjali dielettriċi b'ħafna saffi ġew applikati individwalment fuq għaxar pjanċi tal-kwarz 60 × 60 mm fid-daqs u 0.5 mm ħxuna, li jissodisfaw ir-rekwiżiti li ġejjin: M1: IA = 45°, R ≥ 90% f'520–590 nm, Tave ≥ 90% f'610– 610 nm.700 nm, M2: IA = 45°, R ≥ 90% f'520–530 nm, Tave ≥ 90% f'550–600 nm, M3: IA = 45°, R ≥ 90% f'540–550 nm, Tave ≥ 90 % f'570–600 nm, M4: IA = 45°, R ≥ 90% f'560–570 nm, Tave ≥ 90% f'590–600 nm, M5: IA = 45°, R ≥ 98% f'580–600 nm , R ≥ 98% f'680–700 nm, M6: IA = 45°, Tave ≥ 90% f'600–610 nm, R ≥ 90% f'630–700 nm, M7: IA = 45°, R ≥ 90% f' 620–630 nm, Taw ≥ 90% f'650–700 nm, M8: IA = 45°, R ≥ 90% f'640–650 nm, Taw ≥ 90% f'670–700 nm, M9: IA = 45°, ≥ 90% f'650-670 nm, Tave ≥ 90% f'690-700 nm, BP: IA = 0°, T ≤ 0.01% f'505 nm, Tave ≥ 95% f'530-690 nm f'530-690 nm f'530% ≥ nm 0.01 nm f'-690 nm u T ≤ 1% f'725-750 nm, fejn IA, T, Tave, u R huma l-angolu ta 'inċidenza, trażmissjoni, trażmissjoni medja, u riflessjoni tad-dawl mhux polarizzat.
Dawl abjad (C0) b'medda ta 'wavelength ta' 400–750 nm emess minn sors tad-dawl LED (AS 3000, AS ONE CORPORATION) ġie kcollimat u inċident vertikalment fuq id-DP ta 'firxa ta' mirja dikrojċi.L-ispettru tad-dawl abjad tal-LEDs jidher fil-Figura Supplimentari S3.Poġġi tank akriliku (dimensjonijiet 150 × 150 × 30 mm) direttament quddiem il-firxa tal-mera decamera, biswit il-PSU.Id-duħħan iġġenerat meta s-silġ niexef kien mgħaddas fl-ilma mbagħad ġie mferra 'f'tank akriliku biex josserva l-flussi maqsuma ta' disa 'kuluri C1-C9 li joħorġu mill-firxa ta' mirja dekakromatiċi.
Alternattivament, id-dawl abjad kollimat (C0) jgħaddi minn filtru qabel ma jidħol fid-DP.Il-filtri kienu oriġinarjament filtri ta 'densità newtrali b'densità ottika ta' 0.6.Imbagħad uża filtru motorizzat (FW212C, FW212C, Thorlabs).Fl-aħħarnett, ixgħel il-filtru ND lura.Il-bandwidths tad-disa' filtri bandpass jikkorrispondu għal C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2 u C1, rispettivament.Ċellula tal-kwarz b'dimensjonijiet interni ta '40 (tul ottiku) x 42.5 (għoli) x 10 mm (wisa') tqiegħdet quddiem firxa ta 'mirja dekokromatiċi, biswit il-BP.Id-duħħan imbagħad jiġi mitmugħ permezz ta 'tubu fiċ-ċellula tal-kwarz biex tinżamm il-konċentrazzjoni tad-duħħan fiċ-ċellula tal-kwarz biex tara l-flussi maqsuma ta' disa 'kuluri C1-C9 li joħorġu mill-firxa tal-mera decachromatic.
Vidjow tan-nixxiegħa tad-dawl maqsuma b'disa 'kuluri li toħroġ minn firxa ta' mirja dekaniċi nqabad fil-modalità time-lapse fuq l-iPhone XS.Aqbad immaġini tax-xena f'1 fps u ikkumpila l-immaġini biex toħloq vidjow bi 30 fps (għall-vidjo mhux obbligatorju 1) jew 24 fps (għall-vidjows fakultattivi 2 u 3).
Poġġi pjanċa tal-istainless steel ħoxna ta' 50 µm (b'erba' toqob b'dijametru ta' 50 µm f'intervalli ta' 1 mm) fuq il-pjanċa tad-diffużjoni.Dawl b'wavelength ta '400-750 nm huwa irradjat fuq il-pjanċa tad-diffużur, miksub billi tgħaddi dawl minn lampa aloġena minn filtru ta' trażmissjoni qasir b'tul ta 'mewġ cutoff ta' 700 nm.L-ispettru tad-dawl huwa muri fil-Figura Supplimentari S4.Alternattivament, id-dawl jgħaddi wkoll minn wieħed mill-filtri bandpass ta '10 nm iċċentrat fuq 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 u 690 nm u jolqot il-pjanċa tad-diffużur.Bħala riżultat, erba 'punti ta' radjazzjoni b'dijametru ta 'φ50 μm u wavelengths differenti ġew iffurmati fuq pjanċa tal-istainless steel biswit il-pjanċa tad-diffużur.
Array ta' erba' kapillari b'erba' lentijiet huwa mmuntat fuq spettrometru ta' disa' kuluri kif muri fil-Figuri 1 u 2. C1 u C2.L-erba' kapillari u erba' lentijiet kienu l-istess bħal fi studji preċedenti31,34.Raġġ tal-lejżer b'tul ta 'mewġ ta' 505 nm u qawwa ta '15 mW huwa irradjat simultanjament u b'mod uniformi mill-ġenb għall-punti ta' emissjoni ta 'erba' kapillari.Il-fluworexxenza emessa minn kull punt ta 'emissjoni hija kcollimata mill-lenti korrispondenti u separata f'disa' flussi ta 'kulur minn firxa ta' mirja dekakromatiċi.Is-36 nixxiegħa li rriżultaw imbagħad ġew injettati direttament f'senser tal-immaġni CMOS (C11440–52U, Hamamatsu Photonics K·K.), u l-immaġni tagħhom ġew irreġistrati simultanjament.
ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Ready Reaction Kit (Applied Biosystems), 4 µl GeneScan™ 600 LIZ™ żebgħa tħallat għal kull kapillari billi tħallat 1 µl PowerPlex® 6C Matrix Standard (Promega Corporation), 1 µl standard tad-daqs tat-taħlita.v2.0 (Thermo Fisher Scientific) u 14 µl ilma.L-Istandard tal-Matriċi PowerPlex® 6C jikkonsisti f'sitt frammenti tad-DNA ttikkettjati b'sitt żebgħa: FL-6C, JOE-6C, TMR-6C, CXR-6C, TOM-6C, u WEN, f'ordni ta 'wavelength massimu.It-tulijiet bażi ta 'dawn il-frammenti tad-DNA mhumiex żvelati, iżda s-sekwenza tat-tul tal-bażi ta' frammenti tad-DNA ttikkettjati b'WEN, CXR-6C, TMR-6C, JOE-6C, FL-6C u TOM-6C hija magħrufa.It-taħlita fl-ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Ready Reaction Kit fiha framment tad-DNA ttikkettjat b'żebgħa dR6G.It-tulijiet tal-bażijiet tal-frammenti tad-DNA huma wkoll mhux żvelati.GeneScan™ 600 LIZ™ Dye Size Standard v2.0 jinkludi 36 framment tad-DNA ttikkettjati b'LIZ.It-tulijiet bażi ta’ dawn il-frammenti tad-DNA huma 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214, 220, 240, 250, 260, 280, 300, 4, 30, 4, 30 360, 380, 400, 414, 420, 440, 460, 480, 500, 514, 520, 540, 560, 580 u 600 bażi.Il-kampjuni ġew żnaturati f'94 ° C għal 3 minuti, imbagħad imkessħa fuq is-silġ għal 5 minuti.Il-kampjuni ġew injettati f'kull kapillari f'26 V/ċm għal 9 s u separati f'kull kapillari mimli b'soluzzjoni polimeru POP-7™ (Thermo Fisher Scientific) b'tul effettiv ta' 36 cm u vultaġġ ta '181 V/ċm u angolu ta' 60°.MINN.
Id-dejta kollha miksuba jew analizzata matul dan l-istudju hija inkluża f'dan l-artikolu ppubblikat u l-informazzjoni addizzjonali tiegħu.Data oħra rilevanti għal dan l-istudju hija disponibbli mill-awturi rispettivi fuq talba raġonevoli.
Khan, MJ, Khan, HS, Yousaf, A., Khurshid, K., u Abbas, A. Xejriet kurrenti fl-analiżi tal-immaġini iperspettrali: reviżjoni.Aċċessa IEEE 6, 14118–14129.https://doi.org/10.1109/ACCESS.2018.2812999 (2018).
Vaughan, AH Spettroskopija Interferometrika Astronomika Fabry-Perot.tinstalla.Reverendu Astron.astrofiżika.5, 139-167.https://doi.org/10.1146/annurev.aa.05.090167.001035 (1967).
Goetz, AFH, Wein, G., Solomon, JE u Rock, BN Spectroscopy of Earth remote sensing immaġini.Xjenza 228, 1147–1153.https://doi.org/10.1126/science.228.4704.1147 (1985).
Yokoya, N., Grohnfeldt, C., u Chanussot, J. Fużjoni ta 'dejta iperspettrali u multispettrali: reviżjoni komparattiva ta' pubblikazzjonijiet riċenti.Xjenzi tad-Dinja IEEE.Ġurnal tar-remote sensing.5:29–56.https://doi.org/10.1109/MGRS.2016.2637824 (2017).
Gowen, AA, O'Donnell, SP, Cullen, PJ, Downey, G. u Frias, JM Hyperspectral imaging hija għodda analitika ġdida għall-kontroll tal-kwalità u s-sigurtà tal-ikel.Xejriet fix-xjenza tal-ikel.teknoloġija.18, 590-598.https://doi.org/10.1016/j.tifs.2007.06.001 (2007).
ElMasri, G., Mandour, N., Al-Rejaye, S., Belin, E. u Rousseau, D. Applikazzjonijiet riċenti ta 'immaġini multispettrali għall-monitoraġġ tal-fenotip taż-żerriegħa u l-kwalità - reviżjoni.Sensuri 19, 1090 (2019).
Liang, H. Avvanzi fl-Immaġini Multispettrali u Iperspettrali għall-Arkeoloġija u l-Preservazzjoni tal-Arti.Applika għal 106, 309–323 fiżiku.https://doi.org/10.1007/s00339-011-6689-1 (2012).
Edelman GJ, Gaston E., van Leeuwen TG, Cullen PJ u Alders MKG Immaġini iperspettrali għal analiżi mingħajr kuntatt ta 'traċċi forensiċi.Kriminalistika.intern 223, 28-39.https://doi.org/10.1016/j.forsciint.2012.09.012 (2012).